70 CONGRESO AEP. Libro de comunicaciones

1081 ISBN: 978-84-09-68716-9 ÁREA TRANSVERSAL (MEDICINA PEDIÁTRICA)  ENFERMEDADES RARAS 70 Congreso 6, 7 y 8 de junio de 2024 #753 COMUNICACIÓN ORAL Evaluación de terapias farmacológicas mediante el uso de cultivos primarios obtenidos de en un caso severo de heteroplasia ósea progresiva Irene Rivero Calle 1 , M.ª José Currás Tuala 1 , Alberto Gómez Carballa 1 , Sara Pischedda 1 , Jacobo Pardo Seco 1 , Sandra Viz Lasheras 1 , Roberto Gómez Gallart 2 , Rodolfo Gómez Bahamonde 1 , Jose Gómez Rial 2 , Antonio Salas Ellacuriaga 3 , Federico Martinón Torres 1 1 Instituto de Investigación Sanitaria de Santiago, A Coruña 2 Hospital Clínico Universitario de Santiago, A Coruña 3 Instituto de Ciencias Forenses (INCIFOR), Facultade de Medicina, Universidade de Santiago de Compostela, Instituto de Investigación Sanitaria de Santiago de Compostela, A Coruña INTRODUCCIÓN Y OBJETIVOS La heteroplasia ósea progresiva (HOP) es una enferme- dad genética ultra rara autosómica dominante por una mu- tación heterocigota inactivante localizada en el complejo GNAS, lo que produce formación de hueso extraesquelético a partir de tejido mesodérmico como son piel y músculo. Se ha demostrado la implicación de GNAS en la regulación de la diferenciación de las células madre mesenquimales (MSCs) impactando en el balance de las rutas de señalización impli- cadas en la osteogénesis y adipogénesis como son la vía de señalización rutas Wnt/beta- catenina y ruta Hedgehog (Hh). La HOP es una enfermedad “huérfana” ya que no exis- te actualmente, ningún tratamiento efectivo la alternativa para mejorar la calidad de vida pasa por es la escisión de las lesiones bien delimitadas. El objetivo de este trabajo es eva- luar el efecto diversos fármacos como son: everolimus, vis- modegib y esclerostina mediante el análisis de expresión génica durante la diferenciación osteogénica en un modelo de células primarias aisladas de osificación heterotópica de una paciente con fenotipo extremo de HOP. MÉTODOS Se utilizó método de explante para el aislamiento de os- teoblastos primarios a partir de osificaciones extraídas de la paciente con un fenotipo extremo de la HOP. En un primer experimento las células se expusieron a diferentes dosis de los tratamientos con la finalidad de evaluar la dosis inhibito- ria de la ruta de señalización a la que va dirigida la terapia mas no citotóxica, midiendo la expresión de los genes impli- cados en las distintas rutas de señalización mediante qPCR. Posteriormente se cultivaron células con las dosis inhibito- rias de cada terapia en conjunto con el medio de diferencia- ción osteogénica y se incubaron durante 1, 7, 14 y 21 días y se midió la expresión génica de un panel de 25 genes re- lacionados con adipogénesis y osteogénesis mediante tec- nología n-counter de Nanostring. Los datos obtenidos de estos experimentos fueron normalizados según los criterios de Nanostring y además, con respecto al background . RESULTADOS Hemos observamos un efecto negativo en la diferencia- ción osteogénica en todos los tratamientos testados, sien- do el antineoplásico Vismodegib la terapia con un efecto infra regulador de la mayoría de los genes implicados en la diferenciación osteoblástica. CONCLUSIONES A pesar de la aparente eficacia de la terapia Vismodegib, éste es un fármaco no recomendado para menores de 18 años y la HOP es una enfermedad que se manifiesta duran- te la infancia lo que confiere una limitante para su uso en los momentos críticos en su progresión